五分钟教会你如何使用细胞计数板

　　细胞计数板用于在显微镜下对细胞数量进行计数，是一种常用的微生物计数方法。此法的优点是直观、快速。将经过适当稀释的菌悬液（或孢子悬液）放在血细胞计数板载玻片与盖玻片之间的计数室中，在显微镜下进行计数。

 

　　细胞计数板通常是一块特制的载玻片，其上由四条槽构成三个平台。中间的平台又被一短横槽隔成两半，每一边的平台上各刻有一个方格网，每个方格网共分九个大方格，中间的大方格即为计数室，微生物的计数就在计数室中进行。

 

　　由于计数室的容积是一定的（0.1或0.4mm²），所以可以根据在显微镜下观察到的微生物数目来换算成单位体积内的微生物总数目。由于此法计得的是活菌体和死菌体的总和，故又称为总菌计数法。适用于稀释的菌悬液（或孢子悬液），即液体培养基中菌体的计数。

 

　　使用前，将细菌悬液进行适当稀释，菌液如不浓，可不必稀释。在加样前，先对计数板的计数室进行镜检。若有污物，则需清洗后才能进行计数。

 

　　然后将清洁干燥的血细胞计数板盖上盖玻片，再用无菌的细口滴管将稀释的酿酒酵母菌液由盖玻片边缘滴一小滴（不宜过多），让菌液沿缝隙靠毛细渗透作用自行进入计数室，一般计数室均能充满菌液。

 

　　静止5分钟后，将血细胞计数板置于显微镜载物台上，先用低倍镜找到计数室所在位置，然后换成高倍镜进行计数。在计数前若发现菌液太浓或太稀，需重新调节稀释度后再计数。一般样品稀释度要求每小格内约有5—10个菌体为宜。每个计数室选4或5个中格中的菌体进行计数。