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来看看专业人员使用程序降温盒的方法与经验

发布时间:2021-09-14      点击次数:295

    程序降温盒为成功的细胞低温贮藏和回收提供所需的关键的,可重复的-1℃/分钟的冷冻率。仅需要100%异丙醇和机械式冷冻机。盒子标签上带有图形化的使用步骤说明。可以容纳18个管瓶。支架可防止管瓶与醇接触——以防止由于芯吸作用而造成污染、弄掉标签或在管瓶上留下痕迹。装有醇的容器可在室温下存储,从而节约了冷冻空间。

    程序降温盒使用方法与经验:

    程序降温盒经验1:冻存盒外表面有刻度的吧,异丙醇液面要高于最底线。

    冻存盒肯定是先放在室温,然后放进去细胞,置于-80,利用异丙醇实现梯度降温啊。

    程序降温盒经验2:实验室冻存盒平时放4度,需要冻细胞时直接拿出来用就可以了。第二天转移至液氮,贵重的细胞尽快转移,不然会影响复苏成活率的。一般是用5次就更换一下异丙醇。现在也有一些商品化冻存液可以直接丢进-80的,很方便,效果也不错的。

    程序降温盒经验3:异丙醇的量是要保证的,不能低于表明的线,否则不能起到很好的程序性降温作用,我们是在4度放置,放了细胞后立马放到-80度冰箱,第二天再转移到液氮,效果很不错。

    异丙醇熔点:-87.9度的色透明具有乙醇气味的可燃性有毒液体。注意了有可燃性!急性毒性:口服-大鼠LD50:5840毫克/公斤;口服-小鼠LC50:3600毫克/公斤。刺激数据:眼睛-兔子100毫克/!请注意清理!

    程序降温盒经验4:应该不可以把冻存盒放4°的,因为梯度降温的起始点是室温20°左右,所以从-80℃拿出来的冻存盒应该现在室温静置一段时间待其恢复到室温再使用。而其中的异丙醇应使用6~7此后更换一次,而且保证液体量达到刻度线,否则降温效果会受到影响。

    程序降温盒经验5:冻存盒里的异丙醇一般是250ml,低于刻度了要加上,理论上是5次以后更换异丙醇,但是异丙醇对环境有害,我们可以多用几次,只是少了的时候要加满。还有冻存液里面的DMSO对细胞有毒性,尤其是室温的时候,所以冻存盒和冻存液先放4°,等把细胞用冻存液重悬好了放在冻存盒里,还放回4°,等到出细胞间的时候再拿到-80°里面保存。过夜再转入液氮。

    程序降温盒这个梯度降温可大大提高细胞冻存的存活率,由于程序降温盒内存在100%浓度的异丙醇和泡沫内衬,因此程序降温盒也可以用于细胞复苏。
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